HPLC

Um sicherzustellen, dass Säule und System einwandfrei funktionieren, z.B. nach dem Einbau einer neuen Säule oder nach einer Geräte-Wartung, kann mit chromatographischen Standards das gesamte LC-System (oder LC-MS System) getestet werden. Die universellen Standards liefern sehr einfache Chromatogramme, die als Referenz gesetzt werden können. Zu bestimmten Zeitpunkten, beispielsweise täglich vor Laufbeginn oder 1-2 mal pro Woche, wird der Marker gefahren und gegen das Referenzchromatogramm abgeglichen. Eventuelle Abweichungen können auf Fehler und deren Ursachen hinweisen, ohne dass Sie wertvolle Proben verlieren. Die Richtigkeit Ihrer Resultate ist damit auf Systemebene gewährleistet. Bei Abweichungen erhalten Sie Hinweise, wo der Fehler im System zu finden ist. Die LC-Referenzmaterialen helfen Ihnen dabei, das Vertrauen und die Sicherheit in die Analysenergebnisse zu stärken.

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Product Image of AccQ-Tag Ultra Borat-Puffer, 10 ml
AccQ-Tag Ultra Borat-Puffer, 10 ml
Artikel-Nr.: WT186009283
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Product Image of UHPLC-Säule CORTECS C18, 90 Å, 2.7 µm, 4.6 x 100 mm, mit MarvelX SS UHPLC Verbindungssystem 125 µm x 400 mm, 1 Kit
UHPLC-Säule CORTECS C18, 90 Å, 2.7 µm, 4.6 x 100 mm, mit MarvelX SS UHPLC Verbindungssystem 125 µm x 400 mm, 1 Kit
Artikel-Nr.: WT176004953
Marke: Waters

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Product Image of AccQ-Tag Hydrolysates Chemistry-Kit - Automation
AccQ-Tag Hydrolysates Chemistry-Kit - Automation
Artikel-Nr.: WT176004542
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AccQ-Tag Cell Culture Chemistry-Kit - Automation
Artikel-Nr.: WT176004534
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AccQ-Tag Food & Feed Chemistry-Kit - Automation
Artikel-Nr.: WT176004533
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Product Image of ACQUITY C18 AX Charged Base Glycan Kit, mit 150 mm Säule
ACQUITY C18 AX Charged Base Glycan Kit, mit 150 mm Säule
Artikel-Nr.: WT176004734
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Product Image of ACQUITY C18 AX Charged Base Glycan Kit, mit 100 mm Säule
ACQUITY C18 AX Charged Base Glycan Kit, mit 100 mm Säule
Artikel-Nr.: WT176004733
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Product Image of ACQUITY C18 AX Charged Base Glycan Kit, mit 50 mm Säule
ACQUITY C18 AX Charged Base Glycan Kit, mit 50 mm Säule
Artikel-Nr.: WT176004732
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Product Image of AccQ-Tag Cell Culture Hamilton Script Starter-Kit - USB
AccQ-Tag Cell Culture Hamilton Script Starter-Kit - USB
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AccQ-Tag Cell Culture Hamilton Script Starter-Kit - CD
Artikel-Nr.: WT176004545
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AccQ-Tag Cell Culture TECAN Script Starter-Kit - USB
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Waters SARS-CoV-2 LC-MS System Suitability (RUO)
Artikel-Nr.: WT186010232
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Product Image of GlycoWorks Phosphoglycan SPE-Reagenzien HILIC
GlycoWorks Phosphoglycan SPE-Reagenzien HILIC
Artikel-Nr.: WT186010209
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GlycoWorks Phosphoglycan SPE Elution Pufferlösung, 4 x 5 ml
Artikel-Nr.: WT186009763
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IonHance Glycan C18 AX Ammoniumformiat-Konzentrat, 100 ml
Artikel-Nr.: WT186009762
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Product Image of IonHance Ammoniumacetat pH 6,8 Konzentrat, 100 ml
IonHance Ammoniumacetat pH 6,8 Konzentrat, 100 ml
Artikel-Nr.: WT186009705
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Product Image of UPLC Kit SARS-CoV-2 LC-MS Systemeignungs-Set (RUO)
UPLC Kit SARS-CoV-2 LC-MS Systemeignungs-Set (RUO)
Artikel-Nr.: WT176004949
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465,00 €
Product Image of UPLC Kit SARS-CoV-2 LC-MS Probenvorbereitungs- und Reagenz Kit (RUO)
UPLC Kit SARS-CoV-2 LC-MS Probenvorbereitungs- und Reagenz Kit (RUO)
Artikel-Nr.: WT176004948
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1.900,00 €
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UPLC Kit SARS-CoV-2 LC-MS Re-Order Kit (RUO)
Artikel-Nr.: WT176004947
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UPLC Kit SARS-CoV-2 LC-MS Starter Kit (RUO)
Artikel-Nr.: WT176004946
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3.640,00 €
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ACQUITY RDa Detektor Lock Masskit
Artikel-Nr.: WT186009012
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Product Image of pH-Konzentrat IonHance CX-MS, B, pH 8,5, in MS Certified LDPE Behälter, 10-fach Konzentrate
pH-Konzentrat IonHance CX-MS, B, pH 8,5, in MS Certified LDPE Behälter, 10-fach Konzentrate
Artikel-Nr.: WT186009281
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pH-Konzentrat IonHance CX-MS, A, pH 5, in MS Certified LDPE Behälter, 10-fach Konzentrate
Artikel-Nr.: WT186009280
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IonHance Difluoressigsäure, 1 Fläschchen
Artikel-Nr.: WT186009201
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130,00 €
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QuanRecovery mit MaxPeak HPS 700 µl 96-well-Platten, 5 St/Pkg
Artikel-Nr.: WT186009185
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QuanRecovery mit MaxPeak HPS 700 µl 96-well-Platten, 25 St/Pkg
Artikel-Nr.: WT186009184
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mAb Tryptic Digestion Standard
Artikel-Nr.: WT186009126
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pH-Konzentrat BioResolve CX, B
Artikel-Nr.: WT186009064
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Kairso Amino Acid Interner Standard Set ( 500+)
Artikel-Nr.: WT186009050
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Kairso Amino Acid Kalibrierset (500+)
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IonHance Difluoressigsäure Mobile Phase Kit
Artikel-Nr.: WT176010000
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IonHance CX-MS pH Konzentrate A & B Kit, in MS Certified LDPE Behältern, 10-fach Konzentrate
Artikel-Nr.: WT176004498
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Acrylamid Refill Kit UHPLC Enhanced Cleanup
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Acrylamid Starter Kit UHPLC Enhanced Cleanup
Artikel-Nr.: WT176004423
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Acrylamid Refill Kit LC-MS Enhanced Cleanup
Artikel-Nr.: WT176004420
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Acrylamid Starter Kit LC-MS Enhanced Cleanup
Artikel-Nr.: WT176004419
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Acrylamid Refill Kit LC-MS
Artikel-Nr.: WT176004418
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Acrylamid Starter Kit LC-MS, 96 Analysen
Artikel-Nr.: WT176004417
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IonHance Difluoressigsäure, Super Kit, 6 Fläschchen/Pkg
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Kairos Amino Acid 500+ Manual Re-order
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Kairos Amino Acid 500+ Manual First Time
Artikel-Nr.: WT176004379
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Kairos Amino Acid 500+ Automation Re-Ord
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Kairos Amino Acid 500+ Automation First
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Kairos Amino Acid 100+ Manual First Time
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pH-Konzentrat BioResolve CX, pH 5 und pH 10.2 Kit
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mAB Subunit Standard, Reagent
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ProteinWorks Reduction Alkylation Kit - Cold Storage Refill Kit, Reagent, Protein Standards
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ProteinWorks Auto-eXpress High Trypsin Kit - Cold Storage Refill Kit, Reagent, Protein Standards
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ProteinWorks Auto-eXpress Low Digest Kit - Ambient Refill Kit, Reagent, Protein Standards
Artikel-Nr.: WT186008873
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230,00 €

Die HPLC-Technologie ermöglicht das Arbeiten mit flüssigen oder festen, beziehungsweise nicht flüchtigen Substanzen, die beispielsweise mittels Gaschromatographie nicht analysiert werden können.

Anwendung von HPLC-Standards: Methodik

Die Methodik beruht auf einem Pumpsystem, das das zu analysierende Substanzgemisch durch eine HPLC-Säule leitet. Nach einem zeitlich unterschiedlichen Austritt der einzelnen Komponenten aus der Säule werden diese durch bestimmte Detektoren erfasst und in einem Zeit/Intensitäts-Chromatogramm dargestellt.
Das Substanzgemisch wird in einem passenden Fließmittel, der mobilen Phase, durch das System transportiert. Die Fließmittel werden auch als Eluenten oder Elutionsmittel bezeichnet. Das Säulenmaterial ist fest verankert und dient als stationäre Phase. Das Trennprinzip beruht auf unterschiedlich starken Wechselwirkungen zwischen der Probe und der stationären Phase. Kommt es zu starken Wechselwirkungen, verweilt eine Substanz relativ lange in der Säule und wird später detektiert als solche Substanzen die nur weniger stark mit der stationären Phase wechselwirken.

Die zwei gängigsten Trennmodi in der HPLC ist die Normalphasen-HPLC (NP-HPLC) und die Reversed Phase HPLC (RP-HPLC), die sich im Aufbau der stationären und mobilen Phase unterscheiden: Bei der NP-HPLC wird eine polares Säulenmaterial genutzt. Je polarer die Substanz ist, desto länger verweilt die Substanz auf der Säule. Deutlich häufiger wird die RP-HPLC-Methode angewandt. Hier wird das Kieselgel durch Alkylgruppen so modifiziert, dass es unpolar wird. Als mobile Phase dienen bei der RP-HPLC meist Mischungen aus Wasser, Acetonitril, Methanol und eventuell Puffer.

Um Stoffgemische zu charakterisieren sind Vergleichsreagenzien notwendig. Diese werden mit der mobilen Phase injiziert und ergeben ihrer Konzentration und Beschaffenheit entsprechend Signale. Diese können dann mit den Signalen der zu analysierenden  Substanzen verglichen werden. Hierbei ist die Intensität und die Peakfläche ein Indikator für die Konzentration und die sogenannte Retentionszeit ein Anhaltspunkt für den chemischen Aufbau der Substanz. Unter der Retentionszeit versteht  man den Austrittszeitpunkt der Substanz aus der Säule nach Injektion.

Die gängigsten Säulen haben eine Länge zwischen 20 und 300mm und einen Innendurchmesser von 2-4,6 mm. Um diese Säulen zu schützen, werden häufig Vorsäulen eingesetzt, die Verunreinigungen von der deutlich teureren Hauptsäule fernhalten.

Der Qualitätshersteller Waters bietet analytische Standards und Reagenzien von höchster Qualität. Im Analytics-Shop erhalten Sie eine umfangreiche Auswahl an ISO-zertifizierten, gebrauchsfertigen Lösungen. Diese ersparen Ihnen zeitaufwendiges Ansetzen und Dokumentieren und ermöglichen konsistente, wiederholbare Ergebnisse. Analysevariationen zwischen verschiedenen Geräten, Anwendern, Laboren, Standorten und Ländern werden minimiert. Es sind unterschiedliche Standards und Reagenzien erhältlich: Neutrals QC Reference Material, Reversed-Phase und LCMS QC Reference Material sowie Preparative Chromatography Standard.