HPLC

Um sicherzustellen, dass Säule und System einwandfrei funktionieren, z.B. nach dem Einbau einer neuen Säule oder nach einer Geräte-Wartung, kann mit chromatographischen Standards das gesamte LC-System (oder LC-MS System) getestet werden. Die universellen Standards liefern sehr einfache Chromatogramme, die als Referenz gesetzt werden können. Zu bestimmten Zeitpunkten, beispielsweise täglich vor Laufbeginn oder 1-2 mal pro Woche, wird der Marker gefahren und gegen das Referenzchromatogramm abgeglichen. Eventuelle Abweichungen können auf Fehler und deren Ursachen hinweisen, ohne dass Sie wertvolle Proben verlieren. Die Richtigkeit Ihrer Resultate ist damit auf Systemebene gewährleistet. Bei Abweichungen erhalten Sie Hinweise, wo der Fehler im System zu finden ist. Die LC-Referenzmaterialen helfen Ihnen dabei, das Vertrauen und die Sicherheit in die Analysenergebnisse zu stärken.

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Product Image of Getränke Analysen 5 Standard Lösung
Getränke Analysen 5 Standard Lösung
Artikel-Nr.: WT186006008
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Product Image of Getränke Analysen Waschreagenz, Ethanollösung, 1 L
Getränke Analysen Waschreagenz, Ethanollösung, 1 L
Artikel-Nr.: WT186006007
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Product Image of Getränke Analysen Mobile Phase Reagenz, Acetatpuffer mit Ethanol, 1 L
Getränke Analysen Mobile Phase Reagenz, Acetatpuffer mit Ethanol, 1 L
Artikel-Nr.: WT186006006
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Product Image of MassPREP Protein Standard Mix, Mix aus 6 intakten Proteinen, gefriergetrocknet
MassPREP Protein Standard Mix, Mix aus 6 intakten Proteinen, gefriergetrocknet
Artikel-Nr.: WT186004900
Marke: Waters

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Product Image of MassPREP OST Standard, Annähernd 1 nmol von 15, 20, 25, 30 und 35 Nukleotid, lange Oligodeoxythymidinen, gefriergetrocknet
MassPREP OST Standard, Annähernd 1 nmol von 15, 20, 25, 30 und 35 Nukleotid, lange Oligodeoxythymidinen, gefriergetrocknet
Artikel-Nr.: WT186004135
Marke: Waters

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Product Image of MassPREP Verstärker (5 vials), 500 mg MassPREP Verstärker, 5/PAK
MassPREP Verstärker (5 vials), 500 mg MassPREP Verstärker, 5/PAK
Artikel-Nr.: WT186003863
Marke: Waters

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Product Image of Soft Drink Mobile Phase für SunFire™ Säulen Analyse, Phosphatpuffer mit Ethanol, (4) 1 L
Soft Drink Mobile Phase für SunFire™ Säulen Analyse, Phosphatpuffer mit Ethanol, (4) 1 L
Artikel-Nr.: WT186003858
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Product Image of Soft Drink Analyse SF36 Kit
Soft Drink Analyse SF36 Kit
Artikel-Nr.: WT186003856
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Product Image of AccQ Tag Ultra Eluent B, 950 mL
AccQ Tag Ultra Eluent B, 950 mL
Artikel-Nr.: WT186003839
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AccQTag Ultra Eluent A, Konzentrat, 950 mL
Artikel-Nr.: WT186003838
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Product Image of AccQ•Tag Ultra Chemistry Kit
AccQ•Tag Ultra Chemistry Kit
Artikel-Nr.: WT186003836
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Product Image of MassPREP Enolase Übersicht mit Phosphopeptid Mischung, Hefe Enolase versetzt mit von 4 Hefe Enol. abgel. phosphoryl. Pept.: T18 1P, T19 1P, T43 1P, T43 2P
MassPREP Enolase Übersicht mit Phosphopeptid Mischung, Hefe Enolase versetzt mit von 4 Hefe Enol. abgel. phosphoryl. Pept.: T18 1P, T19 1P, T43 1P, T43 2P
Artikel-Nr.: WT186003286
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Product Image of MassPREP PhosphoPeptid Standard Enolase, 4 Hefe Enolase abgeleitete phosphorylierte Peptide: T18 1P, T19 1P, T43 1P, T43 2P
MassPREP PhosphoPeptid Standard Enolase, 4 Hefe Enolase abgeleitete phosphorylierte Peptide: T18 1P, T19 1P, T43 1P, T43 2P
Artikel-Nr.: WT186003285
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MassPREP EColi Übersicht Standard, Qualit. Standard, der 1 nmol von trypt. verdautem und gereinigtem E.coli cytos. Protein enthält.
Artikel-Nr.: WT186003196
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Product Image of MassPrep Verarbeitungs Standard Mix 2, Der Standard besteht aus einem Bereich von molaren Verhältnissen von tryptisch verdauten Proteinen.
MassPrep Verarbeitungs Standard Mix 2, Der Standard besteht aus einem Bereich von molaren Verhältnissen von tryptisch verdauten Proteinen.
Artikel-Nr.: WT186002866
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Product Image of MassPrep Verarbeitungs Standard Mix 1, Der Standard enthält ein rel. nahe beieinanderlieg. Äquim. Verh. von tryptisch verdauten Proteinen.
MassPrep Verarbeitungs Standard Mix 1, Der Standard enthält ein rel. nahe beieinanderlieg. Äquim. Verh. von tryptisch verdauten Proteinen.
Artikel-Nr.: WT186002865
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Product Image of MassPrep Peptid Mischung, 1 Vial mit jeweils 1 nmol von 9 Peptiden + 1 Porenmarker
MassPrep Peptid Mischung, 1 Vial mit jeweils 1 nmol von 9 Peptiden + 1 Porenmarker
Artikel-Nr.: WT186002337
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Product Image of MassPrep Bovine Serum Albumin Verarbeitungs Standard, Qualitätsstandard enthält annähernd 1 nmol von tryptisch verdautem bovin serum albumin (BSA)
MassPrep Bovine Serum Albumin Verarbeitungs Standard, Qualitätsstandard enthält annähernd 1 nmol von tryptisch verdautem bovin serum albumin (BSA)
Artikel-Nr.: WT186002329
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Product Image of MassPrep Alkohol Dehydrogenase Verarbeitungs Standard, Qualitätsstandard enthält annähernd 1 nmol von tryptisch verdauter Hefe-Alkohol dehydrogenase (ADH)
MassPrep Alkohol Dehydrogenase Verarbeitungs Standard, Qualitätsstandard enthält annähernd 1 nmol von tryptisch verdauter Hefe-Alkohol dehydrogenase (ADH)
Artikel-Nr.: WT186002328
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Product Image of MassPrep Phosphorylase b Standard, Qualitätsstandard enthält annähernd 1 nmol von tryptisch verdauter phosphorylase b
MassPrep Phosphorylase b Standard, Qualitätsstandard enthält annähernd 1 nmol von tryptisch verdauter phosphorylase b
Artikel-Nr.: WT186002326
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130,00 €
Product Image of MassPrep Enolase Verarbeitungs Standard, Qualitätsstandard enthält annähernd 1 nmol von tryptisch verdauter Hefe Enolase.
MassPrep Enolase Verarbeitungs Standard, Qualitätsstandard enthält annähernd 1 nmol von tryptisch verdauter Hefe Enolase.
Artikel-Nr.: WT186002325
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Product Image of RapiGest SF 10 mg, 1/PAK
RapiGest SF 10 mg, 1/PAK
Artikel-Nr.: WT186002123
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RapiGest SF, 1 mg, 5/PAK
Artikel-Nr.: WT186001861
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Product Image of RapiGest SF 1 mg, 1/PAK
RapiGest SF 1 mg, 1/PAK
Artikel-Nr.: WT186001860
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AccQ-Tag Ultra Chemistry Kit
Artikel-Nr.: WT176001235
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ACQUITY UPLC Abs 3 - 5 mm Cell Test Solution Kit
Artikel-Nr.: WT186006695
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ACQUITY RDa Detektor Kalibrier- und Waschset
Artikel-Nr.: WT186009013
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Kairos Amino Acid Qualitätskontrollset (100+)
Artikel-Nr.: WT186009194
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Kairos Amino Acid Kalibrierset (100+)
Artikel-Nr.: WT186009193
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Humanized mAb Massenkontroll-Standard
Artikel-Nr.: WT186009125
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ProteinWorks eXpress Digest Kit - Ambient Refill Kit
Artikel-Nr.: WT186008067
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Kairos Amino Acid 100+ Re-order
Artikel-Nr.: WT176004376
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Agilent Vakuum-Flüssigkeit 45 Platin, 1 qt
Artikel-Nr.: AG5191-5851
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ProteinWorks eXpress Digest Kit - Cold Storage Refill Kit, Reagent, Standards
Artikel-Nr.: WT186008068
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ProteinWorks eXpress Direct Digest Kit - Cold Storage Refill Kit, Reagent, Standards
Artikel-Nr.: WT186008066
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Product Image of ProteinWorks eXpress Direct Digest Kit - Ambient Refill Kit, Reagent, Protein Standards
ProteinWorks eXpress Direct Digest Kit - Ambient Refill Kit, Reagent, Protein Standards
Artikel-Nr.: WT186008065
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Product Image of Calciumcarbonat Certipur Reag. USP, 50 g
Calciumcarbonat Certipur Reag. USP, 50 g
Artikel-Nr.: MC1024100053
Marke: Merck
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Product Image of di-Natriumoxalat Certipur Reag. USP, 60 g, CAS: 62-76-0
di-Natriumoxalat Certipur Reag. USP, 60 g, CAS: 62-76-0
Artikel-Nr.: MC1024070063
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Product Image of Natriumchlorid Certipur Reag. Ph Eur,Reag. USP, 80 g, CAS: 7647-14-5
Natriumchlorid Certipur Reag. Ph Eur,Reag. USP, 80 g, CAS: 7647-14-5
Artikel-Nr.: MC1024060083
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Product Image of Schiffs Reagenz Intense zum Nachweis von Aldehyd und Mukosubstanzen in der Mikroskopie, 1 L
Schiffs Reagenz Intense zum Nachweis von Aldehyd und Mukosubstanzen in der Mikroskopie, 1 L
Artikel-Nr.: MC1025721007
Marke: Merck
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UPLC 5mm Absorptionstestlösungs-Kit
Artikel-Nr.: WT186009240
Marke: Waters
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Dextran Standards-Kit
Artikel-Nr.: WT186009231
Marke: Waters
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RapiGest SF, 10 mg, 4 St/Pkg
Artikel-Nr.: WT186008740
Marke: Waters
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AdvanceBio Gly-X N-Glykan-Vorbereitung mit InstantPC-Kit, 96/Kit
Artikel-Nr.: AGGX96-IPC
Marke: Agilent Technologies
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AdvanceBio Gly-X N-Glykan-Vorbereitung mit InstantPC-Kit, 24/Kit
Artikel-Nr.: AGGX24-IPC
Marke: Agilent Technologies
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AdvanceBio Gly-X N-Glykanvorbereitung mit 2-AB Express, 24/PAK
Artikel-Nr.: AGGX24-2AB
Marke: Agilent Technologies
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LC Passivation Solution, 1760 µg/ml in Methanol (HPLC grade)/Water (50:50), 1ml/ampul
Artikel-Nr.: RE32475
Marke: Restek
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Product Image of Native PFAS Precision and Recovery Standardlösung, > 98%, 12 ml
Native PFAS Precision and Recovery Standardlösung, > 98%, 12 ml
Artikel-Nr.: WTPFAC30PAR
Marke: Waters
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Product Image of ACQUITY RDa Waters_connect LockMasskit
ACQUITY RDa Waters_connect LockMasskit
Artikel-Nr.: WT186009298
Marke: Waters
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Product Image of QuanRecovery mit MaxPeak HPS 12 x 32 mm Schraubverschluss-Fläschchen, 300 µL, 100 St/Pkg
QuanRecovery mit MaxPeak HPS 12 x 32 mm Schraubverschluss-Fläschchen, 300 µL, 100 St/Pkg
Artikel-Nr.: WT186009186
Marke: Waters
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Die HPLC-Technologie ermöglicht das Arbeiten mit flüssigen oder festen, beziehungsweise nicht flüchtigen Substanzen, die beispielsweise mittels Gaschromatographie nicht analysiert werden können.

Anwendung von HPLC-Standards: Methodik

Die Methodik beruht auf einem Pumpsystem, das das zu analysierende Substanzgemisch durch eine HPLC-Säule leitet. Nach einem zeitlich unterschiedlichen Austritt der einzelnen Komponenten aus der Säule werden diese durch bestimmte Detektoren erfasst und in einem Zeit/Intensitäts-Chromatogramm dargestellt.
Das Substanzgemisch wird in einem passenden Fließmittel, der mobilen Phase, durch das System transportiert. Die Fließmittel werden auch als Eluenten oder Elutionsmittel bezeichnet. Das Säulenmaterial ist fest verankert und dient als stationäre Phase. Das Trennprinzip beruht auf unterschiedlich starken Wechselwirkungen zwischen der Probe und der stationären Phase. Kommt es zu starken Wechselwirkungen, verweilt eine Substanz relativ lange in der Säule und wird später detektiert als solche Substanzen die nur weniger stark mit der stationären Phase wechselwirken.

Die zwei gängigsten Trennmodi in der HPLC ist die Normalphasen-HPLC (NP-HPLC) und die Reversed Phase HPLC (RP-HPLC), die sich im Aufbau der stationären und mobilen Phase unterscheiden: Bei der NP-HPLC wird eine polares Säulenmaterial genutzt. Je polarer die Substanz ist, desto länger verweilt die Substanz auf der Säule. Deutlich häufiger wird die RP-HPLC-Methode angewandt. Hier wird das Kieselgel durch Alkylgruppen so modifiziert, dass es unpolar wird. Als mobile Phase dienen bei der RP-HPLC meist Mischungen aus Wasser, Acetonitril, Methanol und eventuell Puffer.

Um Stoffgemische zu charakterisieren sind Vergleichsreagenzien notwendig. Diese werden mit der mobilen Phase injiziert und ergeben ihrer Konzentration und Beschaffenheit entsprechend Signale. Diese können dann mit den Signalen der zu analysierenden  Substanzen verglichen werden. Hierbei ist die Intensität und die Peakfläche ein Indikator für die Konzentration und die sogenannte Retentionszeit ein Anhaltspunkt für den chemischen Aufbau der Substanz. Unter der Retentionszeit versteht  man den Austrittszeitpunkt der Substanz aus der Säule nach Injektion.

Die gängigsten Säulen haben eine Länge zwischen 20 und 300mm und einen Innendurchmesser von 2-4,6 mm. Um diese Säulen zu schützen, werden häufig Vorsäulen eingesetzt, die Verunreinigungen von der deutlich teureren Hauptsäule fernhalten.

Der Qualitätshersteller Waters bietet analytische Standards und Reagenzien von höchster Qualität. Im Analytics-Shop erhalten Sie eine umfangreiche Auswahl an ISO-zertifizierten, gebrauchsfertigen Lösungen. Diese ersparen Ihnen zeitaufwendiges Ansetzen und Dokumentieren und ermöglichen konsistente, wiederholbare Ergebnisse. Analysevariationen zwischen verschiedenen Geräten, Anwendern, Laboren, Standorten und Ländern werden minimiert. Es sind unterschiedliche Standards und Reagenzien erhältlich: Neutrals QC Reference Material, Reversed-Phase und LCMS QC Reference Material sowie Preparative Chromatography Standard.